10x 单细胞5’端转录组+免疫组库测序

在适应性免疫应答中，T 细胞和 B 细胞发挥着关键作用，它们分别凭借 T 细胞受体（TCR）和 B 细胞受体（BCR）识别抗原。这些受体具有高度多样性，能够识别众多不同抗原。其中，BCR 轻链与 TCRβ 链由 V、D、J、C 基因片段构成，BCR 重链和 TCRα 链则由 V、J、C 片段组成，基因重排赋予了它们丰富的多样性。 以往的免疫组库研究存在一定局限性。而 10x Genomics 的 “单细胞免疫谱分析” 技术，借助微流控芯片，搭配 5' 端通用引物与恒定区巢式引物，可对 B 细胞的轻重链或 T 细胞的 αβ 链进行全长测序，实现单细胞层面的免疫组库精准分析。这一技术为全面深入研究免疫组库以及疾病发生机制，提供了高效且强大的平台。

①10x Genomic 单细胞免疫组库测序技术借助精妙的微流控体系，将携带条形码与引物的凝胶珠和单个细胞精准包裹于油滴之中。在油滴内，凝胶珠溶解，促使细胞裂解并释放 mRNA，经逆转录生成带有 UMI 和 barcode 信息的 cDNA。

②待液体油层破裂后，cDNA 被均分为两部分，分别用于构建基因表达文库和免疫组库文库。针对 TCR 或 BCR 的 V (D) J 序列，通过特意设计在 TCR、BCR 或 Ig 的 C 区域的巢式 PCR 引物进行高效富集。

③最后对构建好的文库进行测序检测，便可一次性获取大量单细胞的基因表达数据以及 TCR/BCR 的 V (D) J 全长序列数据，实现单细胞层面上基因表达与免疫组库的同步研究，